第二十八章
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第二十八章 (第1/3页)相思子毒素的结构:
(1）、相思子毒素的一级结构:
相思子毒素是一种分子质量约为63 ku～67 ku的糖蛋白，分子由A 、B两条多肽链通过1个二硫键连接而成。完整毒素在 SDS- PAGE分析时呈一条蛋白带，经二巯基乙醇处理后，A、B两条链分离开，其中A链呈酸性，分子质量约为30 ku，与蓖麻毒素A链存在102个相同的氨基酸残基；B链呈中性，分子质量约35 ku。有关试验表明，相思子毒素两条链经二巯基乙醇还原分离开后，其活性并不丧失。
与蓖麻毒素相似，相思子毒素也是以前体蛋白形式表达，编码前体相思子毒素的基因组不含内含子，从5′端到3′端分别编码由34个氨基酸残基组成的前导序列，250个或251个氨基酸残基组成的A链，10个氨基酸残基组成的连接肽，267个或268个氨基酸残基组成的B链。34个氨基酸残基组成的前导序列很可能包含一个信号肽，诱导前体进入内质网，进行翻译后加工，然后再转运到种子蛋白储存部位，推测信号序列的切点位于第19位的Se
羧基端。
相思子毒素所含的糖基主要存在于B链上，糖的类型为甘露糖和N-乙酰葡萄糖胺，毒素经糖基修饰后，可以增加其自身结构的稳定性，防止降解，增强对极端条件的适应性。已阐明了Ab
i
-a 的B链的2个糖基化位点附近的氨基酸序列及糖链结构，糖肽附近的氨基酸顺序为Asp-As
(CHO)-Gly-Th
，Gly-As
(CHO)-As
，其序列分别类似于Rici
-D的B链Asp94-As
(CHO)-Gly-Th
97，Th
134 –As
(CHO)-As
136。
(2）、相思子毒素的高级结构:
晶体结构研究表明，相思子毒素A链分为3个折叠区域。ab
i
-a的A链C末端比蓖麻毒素少4个氨基酸残基。关于ab
i
-a及蓖麻毒素的A链折叠上的差异都有可能影响对核糖体的识别和结合。相思子毒素a的B链的整个折叠方式与蓖麻毒素相似，但它们的N末端氨基酸残基第1位～12位及几个突环(第39～45，100～106，109～118，133～139，166～170，193～204位氨基酸残基)有较大差异。Ab
i
-a的B链由2个区域组成，每个区域又包含4个亚区λ，α，β，γ，每一区域的主体结构是由α，β，γ组成，亚区2λ连接B链的2个区域，亚区1λ参与A，B链之间二硫键的形成，2个λ亚区间有同源性，但与其他亚区有区别，2个亚区的α，β，γ间均有同源性。除了1λ亚区，ab
i
-a的B链的其他亚区的氨基酸链长度与蓖麻毒素的相应亚区相同。ab
i
-a的1λ亚区N末端比蓖麻毒素的1λ亚区多4个氨基酸残基。Ab
i
-a的B链的每一个区域均包含一个疏水核，形状类似于蓖麻毒素的疏水核。早先有人提出了蓖麻毒素的B链的进化理论，认为B链的祖先是1α亚区，因为仅是1α肽链保留了所有的关键结构和功能特征，基因复制和融合产生了α ，β，γ分子，然后加上λ肽链进一步稳定了分子结构，再复制产生(α、β、γ、λ)2 结构[5-
化学成份:
相思种子含相思子碱（ab
i
e）、相思子灵（ab
ali
e）、下箴刺桐碱（hypapho
i
e），N，N-二甲基色氨酸甲酯的甲阳离子（即下箴刺桐碱甲酯）（methyl este
of N， N-dimethylt
yptopha
methocatio
）、相思豆碱（P
ecato
i
e）、胆碱（choli
e）、胡芦巴碱（t
igo
elli
e）、又含相思子毒蛋白（ab
i
）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，相思子凝集素Ⅰ、Ⅱ（A．P．AⅠ、Ⅱ）、蓖麻毒
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